Atlas de histología vegetal y animal

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Técnicas. Protocolos

HEMATOXILINA de HARRIS

Hematoxilina
Hematoxilina

La hematoxilina de Harris es una buena tinción nuclear, que se puede usar bien de forma regresiva y o bien de forma progresiva. Se emplea mucho en citologías para detectar células malignas. Contiene óxido de mercurio, aunque pude sustituirse por otra sustancia, el cual oxida la hematoxilina a hemateína, que es el verdadero colorante de la solución.

Procedimiento

Variante con mercurio

Hematoxilina cristalizada (C.I. 75290) ... 5 g

Etanol 100º ... 50 ml

Sulfato de amonio y aluminio ... 100 g

Óxido de mercurio (HgO) ... 2.5 g

Agua destilada ... hasta 1000 ml

Variante sin mercurio

Hematoxilina cristalizada (C.I. 75290) ... 5 g

Etanol 100º ... 50 ml

Sulfato de amonio y aluminio ... 100 g

Yodato sódico ... 0,37 g

Agua destilada ... hasta 1000 ml

Preparación

1. Disolver la hematoxilina en el etanol (puede ser necesario añadir algo del agua destilada para su total disolución).

2. Disolver el sulfato de amonio y aluminio en agua caliente.

3. Mezclar las dos soluciones anteriores, y llevar la solución resultante a ebullición.

4. Quitar del calentador, enfriar y añadir el óxido de mercurio o el yodato sódico lentamente y con agitación suave.

5. Solución con yodato sódico: recalentar de nuevo y llevar la solución hasta ebullición

6. Enfriar colocando el vaso de precipitado con la solución en agua helada.

7. Cuando esté fría filtrar la solución y guardar en un frasco oscuro (proteger de la luz).

La solución es estable durante varios meses. Para comprobar su estado, antes de usar, se echa una gota sobre un papel del filtro y debe aparecer un centro de color marrón con un borde de color púrpura. Si esto no ocurre hay que desechar la solución.

Productos

Hematoxilina cristalizada (C.I. 75290)

Etanol 100º

Óxido de mercurio (HgO)

Yodato sódico (NaIO3)

Sulfato de amonio y aluminio (AlNH4(SO4)2)

Agua destilada

Material

Probeta

Balanza

Agitador magnético

Placa calefactora

Vasos de precipitado

Botellas con cierre hermético de cristal oscuro

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