El azul de toluidina (C.I. 52040) es un colorante catiónico que se puede usar en tinciones generales. Se emplea para teñir matrix extracelular, sobre todo en cartílago, pues pone de manifiesto proteoglicanos y glicosomainoglicanos, también para estudiar osteoblastos, mastocitos, botones gustativos, cromosomas y otros. Presenta metacromasia. Esta metacromasia es útil en los tejidos vegetales puesto que distingue las paredes celulares primarias de las secundarias. Molecularmente es una tiazina.
Procedimiento
Azul de toluidina (C.I. 52040) ... 0.5 g
Ácido acético glacial ... 1 ml
Agua destilada o tampón acetato pH 4 ... 99 ml
Consejos
El pH óptimo de trabajo puede variar entre 3 y 5.5, dependiendo del fijador y tipo de tejido. El tiempo de tinción es de unos 3 minutos. La deshidratación ha de ser rápida y empezar en el alcohol de 95º puesto que el colorante se puede perder durante estos pasos.
Hay una solución para mantener el color durante la deshidratación y es convertirlo en molibdato insoluble. Esto se puede hacer sumergiendo las secciones recién teñidas con azul de metileno, y lavadas en agua destilada, en molibdato de amonio al 5% en solución acuosa durante 5 min. Tras lavar ya se puede deshidratar sin problema.
Los núcleos y los carbohidratos se tiñen de azul, aunque presenta metacromasia para algunas estructuras celulares.
Productos
Azul de toluidina (C.I. 52040)
Ácido acético glacial
Tampón acetato
Agua destilada
Material
Probeta
Balanza
Agitador magnético
Medidor de pH
Vasos de precipitado
Botellas con cierre hermético
